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                ELISA試劑盒重點(diǎn):?ELISA試驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配方

                更新時(shí)間:2018-02-27      瀏覽次數(shù):1730

                 

                ELISA試劑盒重點(diǎn):?ELISA試驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配方

                ELISA試驗(yàn)中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為根底,ELISA試劑以及各種溶液如何裝備?上海晶抗技術(shù)教師將ELISA試驗(yàn),各種ELISA裝備辦法匯總?cè)缦拢?/span>
                (1)ELISA試驗(yàn)包被緩沖液
                (2)ELISA試驗(yàn)洗刷緩沖液
                (3)ELISA試驗(yàn)稀釋液;
                (4)ELISA試驗(yàn)停止液
                (5)ELISA底物緩沖液
                (6)ELISA試驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運(yùn)用液
                (7)規(guī)范品稀釋液。
                試劑配方:
                a, ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
                0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
                0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
                加蒸餾水50ml。
                b, ELISA試驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運(yùn)用液:
                TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇)   0.5ml
                底物緩沖液(PH5.5)   10ml
                0.75%H2O2                           32μl
                c,規(guī)范品稀釋液:
                PBS 1L配方pH7.2-7.4.濃度0.01mol/L:
                磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
                磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
                氯化鈉(NaCl):8g,
                KCl 0.2g,
                加去離子水約800mL充沛拌和溶解,然后參加濃鹽酸或許氫氧化鈉調(diào)pH至7.2-7.4,zui終定容到1L.濃度為10mmol/L
                d,ELISA試驗(yàn)包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
                NaHCO3    1.59克
                NaHCO3 2.93克
                加蒸餾水至1000ml
                e, ELISA試驗(yàn)洗刷緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
                KH2PO4   0.2克
                Na2HPO4·12H2O 2.9克
                NaCl   8.0克
                KCl 0.2克
                Tween-20 0.05%  0.5ml
                加蒸餾水至1000ml
                f, ELISA試驗(yàn)稀釋液:
                牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
                加洗刷緩沖液至100ml
                或以羊血清、兔血清等血清與洗刷液配成5~10%運(yùn)用。
                g, ELISA試驗(yàn)停止液(2M H2SO4):
                蒸餾水178.3ml,逐滴參加濃硫酸(98%)21.7ml。
                h,ELISA試驗(yàn)封閉液:
                牛血清白蛋白(BSA) 5克
                加洗刷緩沖液至100ml。
                值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長(zhǎng)期保存。為了確保ELISA試驗(yàn)的準(zhǔn)確性,試驗(yàn)操作中參加的緩沖液和各組分一定要準(zhǔn)確,將洗刷液參加酶標(biāo)板中的時(shí)分避免參加的試劑混入另外一個(gè)酶標(biāo)孔,謹(jǐn)防穿插污染。

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